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白血病流式细胞术免疫分型
作者:yatao    来源:本站原创    浏览: 次   更新时间:2010年03月18日   
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关键字:白血 白血病 流式 流式细胞 细胞 免疫
 白血病是常见的恶性肿瘤之一, 其分型 80 年代以前主要是依靠形态学, 自单克隆抗体与流式细胞术联合应用以来, 使诊断白血病的准确率提高到 90%以上, 从而为临床合理治疗、 判断预后提供了重要的科学依据。检测方法: 标本为骨髓 1 ~ 2 ml, 肝素抗凝,流式细胞术常规方法24 小时内检测。
细胞群表面标志检测淋系抗原 > 30%, 髓系抗原 >20%, 判断为阳性。
形态学无法分型的白血病患者免疫分型结果9 例均为混合细胞白血病, 其中5 例是 T 淋巴系与髓系的混合, 4 例是 B 淋巴系与髓系的混合。
近年来白血病的免疫分型已成为诊断血液恶性肿瘤不可缺少的重要标准之一。流式细胞术单参数免疫标记测定,多不能清楚地显现白血病细胞群体,易将正常细胞包括在内, 往往造成表型分析的误差,影响结果的准确性和可靠性。利用 CD45 / SSC 设门技术, 对白血病细胞群体进行单独分析, 可避免混杂其他细胞表型表达所造成的干扰, 显著提高白血病免疫分型的特异性和敏感性。
目前认为欧洲白血病免疫分型协作组 (EGIL) 提倡的抗原积分系统作为判断免疫表型的标准, 在白血病免疫分型中具有很好的实用价值。最近国内学者亦运用此标准对成人和儿童急性白血病进行了免疫表型分析。
本组资料表明, AML 最常见的抗原表达是CD13, 100% 的 AML 患者表达 CD13, 因此 CD13 是AML 最特异的免疫标志, 并被广泛接受。CD117是 C-Kit 原癌基因细胞表面分化抗原, 它主要是在正常造血干细胞和髓系干祖细胞表达, 本组约有5%AML 患者表达 CD117。HLA-DR 是造血早期分化阶段的表面分化抗原, 在本组病例中也有较高的表达率 (70%) 。CD14 是单核细胞表面的特异性抗原, 在本组 AML 中阳性率较低, 应联合应用其它单抗如 CD15、 CD11b 等来准确地进行 AML 亚型分析。
30 例 ALL 中包括 B-ALL 22 例 (73. 3%) 和 T-ALL 8 例 (26. 6%) 。22 例 B-ALL 中以 CD19 表达量最高 (100%) , 其次是 CD10 (81. 8%) 。CD22 现认为是较晚分化阶段的急性淋巴白血病的标志, 可作为急性淋巴细胞白血病免疫分型中阶段划分的参考, 如果CD22 阳性, 是 T 细胞肿瘤的可能性很小 。ALL 患者伴髓系抗原表达目前研究较多, 阳性率约为 20%~ 40%之间,本组研究是26. 7%。一般认为这种现象是由于白血病异质性所致, 其临床特点及与预后关系尚存在争论。造成 ALL 髓系抗原表达报道不一的原因可能有: 所用的抗体组合不同, 大的抗体组合比较容易发现交叉系列抗原的表达; 所用的染色措施或荧光素不同,PE 标记的抗体与 FITC 标记的抗体相比有较高的敏感性。
慢性白血病 (包括CLL 和CML) 外周血白血病细胞的比例很高, 在流式细胞术散点图上可出现明显扩大的白血病细胞群体, 容易识别。CML 慢性期外周血细胞多为成熟细胞,免疫表型呈髓细胞的特征,但急变期对鉴别急淋变或急粒变有一定的价值。
9 例形态学无法分类的患者经流式细胞术免疫分型后, 确诊为混合细胞白血病, 提示流式细胞术免疫分型可以弥补形态学检查的不足, 提高急性白血病分型准确性, 更好地指导治疗和判断预后。
本研究中, 我们采用了10 种荧光标记单抗, 包括CD2、 CD3 (T 细胞) 、 CD10、 CD19 (B 细胞) 、 HLA-DR(系列非特异) 、 CD13、 CD14、 CD117、 CD64、 CD22 (T细胞或 B 细胞和非淋巴细胞白血病) , 基本上可满足
白血病免疫分型的临床需要。根据不同需要, 还可添加其他单抗如CD15、 CD11b、 CD41 等, 与CD45 搭配,对白血病做进一步的亚型分析, 将更有助于发现和确定双表型, 提高白血病诊断的准确性。
总之, 白血病免疫分型对于白血病的诊断、 治疗和预后判断均有很大帮助, 其在临床诊断中的推广将有助于诊断与治疗更准确。
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