正常的多克隆细胞群的扩增片段含有不同长度的片段,电泳后呈现所谓的“片状”结构。
【临床意义】
当多能造血干细胞向B细胞系定向分化时,最早出现的可检测出的变化是免疫球蛋白的重链基因的重排。应用分子生物学技术证明:免疫球蛋白重链基因的重排是产生抗体多样性和特异性的主要机理之一。因此重排的免疫球蛋白的重链基因可以做为B细胞克隆的标志,不同的B细胞克隆重发生不同类型的重链基因的重排。业已证明,80%以上的B淋巴细胞白血病都发生免疫球蛋白重链基因的重排。由于PCR高度的特异性和敏感性,这就为微小残留病的诊断研究提供了有力的手段。
免疫球蛋白重链变区的多样性来源于免疫球蛋白基因的可变区(V)、多样区(D)和连接区(J)的重排结果(V-D-J)。变区基因的可变性并不是均匀分布在整个变区的全长,而是集中在三个区域,被4个序列保守的框架区(FR1-FR4)所分割。由于这三个高变区决定着抗体与抗原的结合部位,因此称为互补决定区(CDR)。其中第三互补决定区(CDRⅢ)中含有整个的V-D-J信息,故可变性最高,可代表细胞克隆的标志。单克隆的B淋巴细胞白血病标本经PCR扩增后,产生明显抽一长度的扩增片段,电泳呈紧密的带状结构,据此对残留白血病克隆进行检测和临床问题研究。
中国医科院肿瘤医院以IgH基因重排为肿瘤细胞基因标志,采用PCR-SSCP技术对B淋巴细胞恶性肿瘤骨髓标本进行了微小残存病变(MRD)检测。在38例形态学检查正常的B细胞非何杰金淋巴瘤患者治疗前的骨髓标本中,MRD检出率为68.4%(26/38),MRD阳性者的生存期明显短于阴性者(P<0.05);在21例处于完全缓解期的B细胞急性淋巴细胞白血病骨髓标本中,MRD检出率为71.4(15/21),其阳性者无病存活期明显短于阴性者(P<0.05)。结果表明:该项检测可用于B淋巴细胞恶性肿瘤及白血病的预后估价,疗效判断与复发监测。