患者静脉血8ml，5ml放入普通试管内，3ml放入有玻璃珠的三角烧瓶内轻轻振摇8～10分钟，分别提取血清和脱纤维血，后者制成50%RBC悬液。

    正常对照：取与患者同血型或AB型的正常人血液，制法同上。

    正常人红细胞在自身酸化血清(PH6.6～6.8）条件下，经37℃孵育1h不发生溶血现象。
    【正常参考值】
    阴性

　
    【异常结果分析】
    阵发性睡眠性血红蛋白尿（PNH）患者的红细胞膜有缺陷，对补体敏感，在用稀盐酸酸化的正常人血清中，经孵育后可出现溶血现象，因此可作为PNH的诊断依据。部分遗传性球形红细胞增多症和自身免疫性溶血性贫血的病人,本试验也可呈阳性反应。